1.Wat is selkultuur?
Selkultuur verwys na die verwydering van selle van diere of plante en dan in 'n gunstige kunsmatige omgewing.Die selle kan direk uit die weefsel geneem word en deur ensiematiese of meganiese middele afgebreek word voordat dit gekweek word, of hulle kan afgelei word van gevestigde sellyne of sellyne.
2.Wat is primêre kultuur?
Primêre kultuur verwys na die kultuurstadium nadat selle van die weefsel geskei is en onder toepaslike toestande vermeerder totdat hulle alle beskikbare substrate beset (dit wil sê, samevloeiing bereik).Op hierdie stadium moet die selle gesubkweek word deur dit na 'n nuwe houer met vars groeimedium oor te plaas om meer spasie vir voortgesette groei te bied.
2.1 Sellyn
Na die eerste subkultuur word die primêre kultuur 'n sellyn of subkloon genoem.Sellyne afkomstig van primêre kulture het 'n beperkte lewensduur (dws hulle is beperk; sien hieronder), en soos hulle verbygaan, oorheers die selle met die hoogste groeivermoë, wat lei tot 'n sekere mate van genotipe in die populasie wat met fenotipe aanhou.
2.2 Selstam
Indien 'n subpopulasie van 'n sellyn positief uit die kultuur geselekteer word deur kloning of 'n ander metode, sal die sellyn 'n sellyn word.Selstamme verkry gewoonlik bykomende genetiese veranderinge nadat die ouerlyn begin het.
3.Beperkte en deurlopende sellyne
Normale selle verdeel gewoonlik slegs 'n beperkte aantal kere voordat hulle die vermoë om te prolifereer verloor.Dit is 'n geneties bepaalde gebeurtenis wat veroudering genoem word;hierdie sellyne word eindige sellyne genoem.Sommige sellyne word egter onsterflik deur 'n proses wat transformasie genoem word, wat spontaan kan plaasvind of deur chemikalieë of virusse geïnduseer kan word.Wanneer 'n eindige sellyn transformasie ondergaan en die vermoë kry om onbepaald te verdeel, word dit 'n aaneenlopende sellyn.
4. Kultuur toestand
Die kweektoestande van elke seltipe verskil baie, maar die kunsmatige omgewing vir die kweek van selle is altyd saamgestel uit 'n geskikte houer wat die volgende bevat:
4.1 Substraat of kultuurmedium wat noodsaaklike voedingstowwe verskaf (aminosure, koolhidrate, vitamiene, minerale)
4.2 Groeifaktore
4.3 Hormone
4.4 Gasse (O2, CO2)
4.5 Gereguleerde fisiese en chemiese omgewing (pH, osmotiese druk, temperatuur)
Die meeste selle is verankering-afhanklik en moet op 'n soliede of semi-soliede substraat (aanhegter of monolaag kultuur) gekweek word, terwyl ander selle swaaiend in die medium (suspensiekultuur) kan groei.
5.Kryopreservering
As daar oortollige selle in die subkultuur is, moet hulle met 'n toepaslike beskermende middel (soos DMSO of gliserol) behandel word en by 'n temperatuur onder -130°C (kriopreservering) gestoor word totdat dit benodig word.Vir meer inligting oor subkultuur en kriopreservering van selle.
6. Morfologie van selle in kultuur
Selle in kultuur kan in drie basiese kategorieë verdeel word op grond van hul vorm en voorkoms (dws morfologie).
6.1 Fibroblaste selle is bipolêr of multipolêr, het 'n verlengde vorm en groei vas aan die substraat.
6.2 Epiteelagtige selle is veelhoekig, het 'n meer gereelde grootte en is in diskrete velle aan die matriks geheg.
6.3 Limfoblastagtige selle is sferies en groei gewoonlik in suspensie sonder om aan die oppervlak te heg.
7. Toepassing van selkultuur
Selkultuur is een van die hoofinstrumente wat in sel- en molekulêre biologie gebruik word.Dit bied 'n uitstekende modelstelsel vir die bestudering van die normale fisiologie en biochemie van selle (soos metaboliese navorsing, veroudering), die uitwerking van dwelms en giftige verbindings op selle, en mutagenese en karsinogene effekte.Dit word ook gebruik vir dwelmsifting en ontwikkeling en grootskaalse vervaardiging van biologiese verbindings (soos entstowwe, terapeutiese proteïene).Die grootste voordeel van die gebruik van selkultuur vir enige van hierdie toepassings is die konsekwentheid en reproduceerbaarheid van die resultate wat verkry kan word deur 'n bondel gekloonde selle te gebruik.
Postyd: Jun-03-2019